Astrablau-Färbung
Untersuchungsmaterial
Gewebeschnitte, die saure Mucosubstanzen enthalten.
Ziel der Untersuchung
Nach der hier beschriebenen Färbemethode lassen sich insbesondere saure Mucosubstanzen im Gewebe färberisch darstellen. Neutrale Mucosubstanzen lassen sich durch eine anschließende PAS-Reaktion abgrenzen.
Prinzip der Färbung
Der Farbstoff Astrablau, ein wasserlöslicher Phtalocyaninfarbstoff, wird zur selektiven Färbung von Mucosubstanzen benutzt. Diese undifferenzierte Methode ermöglicht nur den Nachweis saurer Mucosubstanzen ohne Unterscheidung von Carboxyl- und Sulfatgruppen. Zellkerne werden von Alcianblau nicht angefärbt.
Für die basischen Kupferphtalocyanine muss bereits bei der Vorbehandlung ein saurer pH-Wert streng eingehalten werden, weil die Reaktion sonst durch freiwerdende Sulfongruppen verfälscht würde. Auch Schwefelsäure ist zu meiden, weil es zu Veresterung an Hydroxylgruppen kommen kann. Bei richtiger Behandlung werden die Schleimstoffe exkretorischer Drüsen und von Tumoren, Kittsubstanzen, Mastzellgranula und die Knorpelgrundsubstanz gefärbt, der neutrale Magenschleim reagiert nicht. Da bei einem pH-Wert von 1 auch Kerne gefärbt werden, empfiehlt sich eine Vorbehandlung mit 2-3 % iger Weinsäure.
Durchführung
| Schnitte in Xylol entparaffinieren* | 2x 10 Min. |
| absteigende Alkoholreihe** bis Aqua dest. durch mehrmaliges Eintauchen überführen | je ca. 1 Min. |
| 1%ige Essigsäure-Lösung | 2 Min. |
| 1%ige Astrablau-Lösung | 10 Min. |
| überschüssige Farbreste durch mehrmaliges Eintauchen in Aqua dest. entfernen | 30 sec. - 2 Min. |
| 0,1%ige Kernechtrot-Lösung | 5 - 15 Min. |
| aufsteigende Alkoholreihe**: Xylol: 100%-2x schwenken ; zum Entwässern, Aufhellen und Härten der Schnitte. | |
| Eindecken mit wasserunlöslichem Einschlußmittel | |
*Entparaffiniert: Xylol: 100% - 2x schwenken; Isopropanol: 96%- 2x/70% - 1x insgesamt jeweils 3x
**Absteigende Alkoholreihe: mehrmaliges Eintauchen; umgekehrte Reihenfolge s.o.
***Aufsteigende Alkoholreihe: Xylol 70%/96%/100%
Färbeergebnis
| Saure Mucosubstanzen | blau |
| Kerne | rot |
| Cytoplasma | farblos |
