Untersuchungsmaterial
Gewebeschnitte aus dem Magen-Darm-Trakt sowie ganz unterschiedliche Gewebeproben mit Verdacht auf Amyloidose.
Ziel der Untersuchung
Nach der hier beschriebenen Methode lassen sich Amyloid-Substanzen im Gewebe färberisch darstellen.
Prinzip der Färbung
Die Kongorotfärbung dient zur Darstellung von Belegzellen im Magen-Darm-Trakt oder zum Amyloidnachweis. Kongorot, ein kolloidaler saurer Diazofarbstoff, lagert sich an die parallel zueinander liegenden Amyloidfibrillen an, wobei es zu einer Wasserstoffbrückenbildung kommt.
Amyloid ist ein nur unter krankhaften Bedingungen auftretender, elektronenoptisch fibrillär gebauter, lichtoptisch homogener Eiweißkörper, der seinen Namen auf Grund seines stärkeähnlichen Verhaltens der Jodreaktion gegenüber trägt (Amylon = Stärke).
Amyloid findet sich an den retikulären und / oder kollagenen Fasern von Nieren, Leber, Milz, Herzmuskel, Zungengrund, Oesophagus u.a. Organe angelagert.
Durchführung
| Schnitte in Xylol entparaffinieren* | 2 x 10 Min |
| Objektträger werden über die absteigende Alkoholreihe** bis zum A. dest. durch mehrmaliges Eintauchen überführt | je ca 1 Min |
| Objektträger in filtrierte Kongorot-Lösung überführen | 30 Min |
| Eintauchen in gesättigte Lithiumcarbonatlösung | 15 sek |
| schnell differenzieren in 50%igem Alkohol bis Kongoschlieren den Objektträger herablaufen | |
| sofort in Aqua dest. abspülen, ist der Schnitt nicht gleichmäßig entfärbt, Schritte 3 und 4 wiederholen | |
| Spülen in Leitungswasser | 15 Min |
| Kerngegenfärbung mit Hämalaun n. Meyer | 10 Min |
| Bläuen u. Stabilisieren der Kernfärbung in Leitungswasser | kalt 10 Min, warm 5 Min |
| Aufsteigende Alkoholreihe*** zum Entwässern, Härten und Aufhellen der Schnitte | |
| Objektträger in Xylol überführen | |
| Eindecken mit wasserunlöslichem Einschlußmittel | |
*Entparaffiniert: Xylol: 100% - 2x schwenken; Isopropanol: 96%- 2x/70% - 1x insgesamt jeweils 3x
**Absteigende Alkoholreihe: mehrmaliges Eintauchen; umgekehrte Reihenfolge s.o.
***Aufsteigende Alkoholreihe: Xylol 70%/96%/100%
Färbeergebnis
| Kerne, Kalk, Knorpel | blau |
| Amyloid | hellrot |
| Restliches Gewebe | bläulich |
Untersuchungsmaterial Gewebeschnitte aus dem Magen-Darm-Trakt sowie ganz unterschiedliche Gewebeproben mit Verdacht auf Amyloidose. Ziel der Untersuchung Nach der hier...
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Gewebeschnitte aus dem Magen-Darm-Trakt sowie ganz unterschiedliche Gewebeproben mit Verdacht auf Amyloidose.
Ziel der Untersuchung
Nach der hier beschriebenen Methode lassen sich Amyloid-Substanzen im Gewebe färberisch darstellen.
Prinzip der Färbung
Die Kongorotfärbung dient zur Darstellung von Belegzellen im Magen-Darm-Trakt oder zum Amyloidnachweis. Kongorot, ein kolloidaler saurer Diazofarbstoff, lagert sich an die parallel zueinander liegenden Amyloidfibrillen an, wobei es zu einer Wasserstoffbrückenbildung kommt.
Amyloid ist ein nur unter krankhaften Bedingungen auftretender, elektronenoptisch fibrillär gebauter, lichtoptisch homogener Eiweißkörper, der seinen Namen auf Grund seines stärkeähnlichen Verhaltens der Jodreaktion gegenüber trägt (Amylon = Stärke).
Amyloid findet sich an den retikulären und / oder kollagenen Fasern von Nieren, Leber, Milz, Herzmuskel, Zungengrund, Oesophagus u.a. Organe angelagert.
Durchführung
| Schnitte in Xylol entparaffinieren* | 2 x 10 Min |
| Objektträger werden über die absteigende Alkoholreihe** bis zum A. dest. durch mehrmaliges Eintauchen überführt | je ca 1 Min |
| Objektträger in filtrierte Kongorot-Lösung überführen | 30 Min |
| Eintauchen in gesättigte Lithiumcarbonatlösung | 15 sek |
| schnell differenzieren in 50%igem Alkohol bis Kongoschlieren den Objektträger herablaufen | |
| sofort in Aqua dest. abspülen, ist der Schnitt nicht gleichmäßig entfärbt, Schritte 3 und 4 wiederholen | |
| Spülen in Leitungswasser | 15 Min |
| Kerngegenfärbung mit Hämalaun n. Meyer | 10 Min |
| Bläuen u. Stabilisieren der Kernfärbung in Leitungswasser | kalt 10 Min, warm 5 Min |
| Aufsteigende Alkoholreihe*** zum Entwässern, Härten und Aufhellen der Schnitte | |
| Objektträger in Xylol überführen | |
| Eindecken mit wasserunlöslichem Einschlußmittel | |
*Entparaffiniert: Xylol: 100% - 2x schwenken; Isopropanol: 96%- 2x/70% - 1x insgesamt jeweils 3x
**Absteigende Alkoholreihe: mehrmaliges Eintauchen; umgekehrte Reihenfolge s.o.
***Aufsteigende Alkoholreihe: Xylol 70%/96%/100%
Färbeergebnis
| Kerne, Kalk, Knorpel | blau |
| Amyloid | hellrot |
| Restliches Gewebe | bläulich |
