Untersuchungsmaterial
Zytologische Abstriche
Ziel der Untersuchung
Darstellung der zyklischen Schwankungen im geschichteten Plattenepithel des weiblichen Genitaltrakts.
Prinzip der Färbung
Hierbei handelt es sich um eine succedane Mehrfachfärbung. Das positiv geladene Hämatoxylin nach Harris färbt aufgrund von elektropolarer Bindung die negativ geladenen Phosphatgruppen der DNA der Kerne
Der saure Farbstoff Orange-G und die polychromen Farbstoffe EA 31/50/65 färben das Cytoplasma durch elektropolare Bindung und Allochromasie.
Durchführung
feuchte Abstriche werden fixiert | |
Abstrich trocknen lassen | 20 Min |
Abstrich in A. dest überführen um Polyäthylenglykol abzulösen (in Fixierspray) | ca 2 Min |
Harris´Hämatoxylin | 3-5 Min |
Spülen in A. dest, um Farbreste zu entfernen | ca 2 Min |
Differenzieren der Kernfärbung in 0,03 N HCL Es gehen rotbraune Farbwolken ab. | 1-2 x Eintauchen |
Bläuen in Leitungswasser | kalt 10 Minuten, warm 5 Minuten |
Aufsteigende Alkoholreihe** | je 1 Minute |
2%ige wässrige Orange-G-Lösung | 3-5 Min |
Spülen in 96%igem Isopropanol | 2 x Eintauchen |
EA50/AE31/EA65 | 3-5 Min |
Spülen in 96%igem Isopropanol | 2 x Eintauchen |
aufsteigende Alkoholreihe***, Xylol | |
Eindecken mit wasserunlöslichem Einschlussmittel | |
*Entparaffiniert: Xylol: 100% - 2x schwenken; Isopropanol: 96%- 2x/70% - 1x insgesamt jeweils 3x
**Absteigende Alkoholreihe: mehrmaliges Eintauchen; umgekehrte Reihenfolge s.o.
***Aufsteigende Alkoholreihe: Xylol 70%/96%/100%
Färbeergebnis
Kerne | dunkelviolett |
Erythrozyten | rot |
Cytoplasma (je nach Reifegrad) | eosinophil, zyanophil, amphophil (Übergangsphase) |
Untersuchungsmaterial Zytologische Abstriche Ziel der Untersuchung Darstellung der zyklischen Schwankungen im geschichteten Plattenepithel des weiblichen Genitaltrakts. Prinzip der...
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Zytologische Abstriche
Ziel der Untersuchung
Darstellung der zyklischen Schwankungen im geschichteten Plattenepithel des weiblichen Genitaltrakts.
Prinzip der Färbung
Hierbei handelt es sich um eine succedane Mehrfachfärbung. Das positiv geladene Hämatoxylin nach Harris färbt aufgrund von elektropolarer Bindung die negativ geladenen Phosphatgruppen der DNA der Kerne
Der saure Farbstoff Orange-G und die polychromen Farbstoffe EA 31/50/65 färben das Cytoplasma durch elektropolare Bindung und Allochromasie.
Durchführung
feuchte Abstriche werden fixiert | |
Abstrich trocknen lassen | 20 Min |
Abstrich in A. dest überführen um Polyäthylenglykol abzulösen (in Fixierspray) | ca 2 Min |
Harris´Hämatoxylin | 3-5 Min |
Spülen in A. dest, um Farbreste zu entfernen | ca 2 Min |
Differenzieren der Kernfärbung in 0,03 N HCL Es gehen rotbraune Farbwolken ab. | 1-2 x Eintauchen |
Bläuen in Leitungswasser | kalt 10 Minuten, warm 5 Minuten |
Aufsteigende Alkoholreihe** | je 1 Minute |
2%ige wässrige Orange-G-Lösung | 3-5 Min |
Spülen in 96%igem Isopropanol | 2 x Eintauchen |
EA50/AE31/EA65 | 3-5 Min |
Spülen in 96%igem Isopropanol | 2 x Eintauchen |
aufsteigende Alkoholreihe***, Xylol | |
Eindecken mit wasserunlöslichem Einschlussmittel | |
*Entparaffiniert: Xylol: 100% - 2x schwenken; Isopropanol: 96%- 2x/70% - 1x insgesamt jeweils 3x
**Absteigende Alkoholreihe: mehrmaliges Eintauchen; umgekehrte Reihenfolge s.o.
***Aufsteigende Alkoholreihe: Xylol 70%/96%/100%
Färbeergebnis
Kerne | dunkelviolett |
Erythrozyten | rot |
Cytoplasma (je nach Reifegrad) | eosinophil, zyanophil, amphophil (Übergangsphase) |